杆状病毒穿梭载体bacmid小量抽提试剂盒

Alphabio生产的杆状病毒穿梭载体bacmid小量抽提试剂盒(Baculovirus Shuttle Vector Bacmid Mini Preparation Kit, 简称Bacmid Miniprep Kit)是一种从大肠杆菌DH10Bac中简单快速抽提高质量可完美应用于昆虫细胞转染的bacmid的试剂盒。
主要特点：简单快速，不使用剧毒试剂，无须酚氯仿抽提，无须过柱纯化，有效解决bacmid分子量大、抽提难度高等系列问题，确保抽提获得的bacmid可完美用于昆虫细胞转染。
当目的基因被插入到pFastBac系列载体中构建成目的重组质粒后，该重组质粒可用于转化大肠杆菌DH10Bac从而发生位点特异的转座(site-specific transposition)，蓝白斑筛选和PCR鉴定筛选含有重组bacmid的重组子，再使用本试剂盒进行bacmid的小量抽提即可获得可转染昆虫细胞的bacmid DNA。
本试剂盒在抽提bacmid的同时，也会抽提辅助质粒(helper plasmid)和未重组的pFastBac质粒。抽提获得的bacmid等质粒混合物可以直接用于转染昆虫细胞以包装杆状病毒，最终用于目的蛋白在昆虫细胞中的大量表达。
Bac-to-Bac杆状病毒表达系统是由Luckow等人于1993年发展的一种快速而有效产生重组杆状病毒的方法。该系统主要包括以下两个组分：(1)用于插入目的基因的pFastBac载体，目的基因插入后受杆状病毒特异性启动子(baculovirus-specific promoter)调控表达；(2)含杆状病毒穿梭载体bacmid (bMON14272, 136kb)和辅助质粒(helper plasmid，用于表达转座必须的转座蛋白)的大肠杆菌DH10Bac宿主菌株。将pfastBac重组质粒转化该菌株可发生pfastBac重组质粒中mini-Tn7元件和bacmid上的mini-attTN7发生转座，从而形成重组的bacmid。


保存条件：
室温保存，一年有效。
注意事项： 
第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加入到溶液I (悬浮液)中，混匀，并在瓶上做好标记。加入RNase A后须4℃存放。
温度较低时，溶液II和溶液III可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀，37℃水浴加热溶解，混匀后使用。
溶液II请勿过分剧烈混匀，否则会产生大量气泡。
溶液II使用完后，请注意盖紧瓶盖，以避免被空气中二氧化碳酸化。
本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行，但在4℃进行离心也是可以的。
溶液II有强碱性，溶液II和溶液III对人体都有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。